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    上海飛測赭曲霉毒素A免疫親和柱

    產品型號:

    更新時間:2019-07-17

    簡要描述:

    上海飛測赭曲霉毒素A免疫親和柱用于定性、定量檢測谷物、酒類、中藥等食品和飼料等樣本中的赭曲霉毒素A時的樣品前處理。

      【概要】

      赭曲霉毒素A (Ochratoxin A)是曲霉屬和青霉屬的真菌形成的次級代謝產物,屬烈性的shen臟毒和gan臟毒,廣泛存在于各種食物中,谷物及其副產品是赭曲霉毒素A的主要來源。動物實驗表明攝入了被這種毒素污染的飼料后,會發生急性或慢性中毒癥。防止污染赭曲霉毒素A的食品和飼料直接或間接地進入人類食物鏈,加強對赭曲霉毒素A的檢測十分重要。

    赭曲霉毒素A免疫親和柱

      【適用范圍及性能】

      用于定性、定量檢測谷物、酒類、中藥等食品和飼料等樣本中的赭曲霉毒素A時的樣品前處理。

      柱容量:≥200ng

      回收率:≥90%

      【試驗原理】

      本產品的測定的基礎是抗原抗體反應,赭曲霉毒素A單克隆抗體連接在柱內凝膠上,樣品中的赭曲霉毒素A經過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過赭曲霉毒素A免疫親和層析柱,在免疫親和柱內,赭曲霉毒素A與抗體結合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他物質。用甲醇洗脫赭曲霉毒素A,然后注入到分析儀器中用于檢測。

      【包裝組成】

      根據不同規格,每一個盒中包含5/25支赭曲霉毒素A免疫親和層析柱及1份說明書。

      【需要而未提供的設備及試劑】

      設備:

      1. 高速均質器或組織勻漿機

      2. 粉碎機

      3. 200mL/50mL量筒

      4. 天平:感量0.1g

      5. 微量移液器:單道 100mL~1000mL

      6. 槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)

      7. 玻璃微纖維濾紙(1.5mm孔徑)

      8. 50mL漏斗

      9. 一次性玻璃試管

      10. 泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)

      試劑:

      1. 甲醇(色譜級)

      2. 乙酸(分析純,色譜級)

      3. 蒸餾水或去離子水

      4. pH7.0磷酸鹽緩沖溶液(PBS緩沖液):稱取8.0g氯hua鈉,1.2g磷酸氫二鈉,0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯hua鉀,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調節pH值至7.0,最后用純水稀釋至1000mL

      5. 樣品提取液:配制甲醇-水(8:2)溶液作為樣品提取液

      洗脫液:配制甲醇-乙酸(99:1)溶液作為洗脫液

      【試劑配制】

      樣品提取液:配制甲醇-水(8:2)溶液作為樣品提取液

      洗脫液:配制甲醇-乙酸(99:1)溶液作為洗脫液

      【樣本處理步驟】

      (一)花生,玉米,大米,小麥及其制品和飼料(稀釋倍數2.5)

      1. 稱取20g粉碎的樣品于100mL容量瓶中,加入5.0g氯hua鈉,以甲醇-水(8:2)溶液定容至100mL;

      2. 轉移到均質杯中,以均質器高速攪拌,提取2min;

      3. 4000r/min離心5min或用定量濾紙過濾;

      4. 取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待測;

      5. 將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;

      6. 將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1滴/S流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;

      7. 以10.0mL清洗緩沖液淋洗柱子1次,流速為1-2滴/S,棄去全部流出液;

      8. 再以10.0mL水淋洗柱子1次,流速為1-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;

      9. 準確加入1.0mL洗脫液洗脫,流速為1 滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。

      (二)啤酒,黃酒等酒類(稀釋倍數1)

      1. 取10mL試樣脫氣后與90mLPBS緩沖液混勻,用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待測;

      2. 將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;

      3. 將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1滴/S流速緩慢通過免疫親和柱,直至2mL~3mL空氣通過柱體;

      4. 以10.0mL清洗緩沖液淋洗柱子1次,流速為1-2滴/S,棄去全部流出液;

      5. 再以10.0mL水淋洗柱子1次,流速為1-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;

      6. 準確加入1.0mL洗脫液洗脫,流速為1 滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。

      【結果判定】

      經免疫親和柱凈化后,收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計或者HPLC檢測,也可使用薄層色譜或者酶聯免疫試劑盒進行檢測。

      【注意事項】

      1. 赭曲霉毒素危害極大,應戴手套操作;

      2. 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。

      3. 洗脫液可以直接使用色譜級甲醇洗脫,但會降低回收率。

      【貯藏條件及保存期】

      貯藏條件:親和柱可于常溫保存,2-8℃儲存可延長有效期,不可凍存;

      保存期:該產品有效期為12個月。

     

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