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    嘔吐毒素免疫親和柱,簡便快速操作性強

    產品型號:FD-C31

    更新時間:2020-04-07

    簡要描述:

    上海飛測嘔吐毒素免疫親和柱,簡便快速操作性強,適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理,提高了樣品的純度,純化后的提取液可用不同的分析方法測定。

      脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON) 又稱嘔吐毒素(vomitoxin),主要是由鐮刀菌的某些種產生的化學結構和生物活性相似的有毒代謝產物——單端孢霉烯族化合物中的一種。廣泛存在于全球,主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物,也污染糧食制品,人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產生廣泛的毒性效應。DONzui明顯的毒性作用是引起嘔吐、腹瀉、腹痛等癥,并延緩生長、降低免疫機能,與貧血、免疫抑制、食管癌、克山病也具有密切聯系。給人、家畜的健康造成巨大威脅。

      【產品用途】

      脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(又稱嘔吐毒素,簡稱DON)免疫親和柱適合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析試劑盒結合使用,定量檢測DON。適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理,提高了樣品的純度,純化后的提取液可用不同的分析方法測定。

      【測定原理】

      本產品測定的基礎是抗原抗體反應,抗嘔吐毒素(DON)的單克隆抗體連接在柱內凝膠介質上,樣品中的DON經過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢通過DON免疫親和柱,在免疫親和柱內,DON與抗體結合,洗滌液通過免疫親和柱除去未被結合的雜質。最后采用甲醇洗脫DON,然后進行相關分析。

      【試劑配制】

      0.1%吐溫20-PBS溶液:將0.1%吐溫20-PBS粉末(廠家提供)直接用900mL水全部溶解后,用HCl或NaOH調pH至7.4,最后用水定容至1L。

      5M NaOH溶液:稱取20g NaOH,溶于100mL水中。

      【樣品制備】

      ----準確稱取25g(精確至0.01g)粉碎的樣品,加入5g聚乙二醇8000,并與125mL水混合,搖床振蕩提取15min;

      ----用快速定性濾紙過濾或4000r/min,離心5min;對于pH低于6.0的玉米加工副產物及飼料等的濾液或上清液,需要用5M NaOH調pH至7.0左右,并用玻璃微纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用;

      ----準確移取2.5mL混勻濾液(相當于0.5g樣品)過親和柱。

      【親和柱凈化】

      注意:整個純化過程盡量不要讓柱子干燥!

      ----3mL柱管取出上方堵頭,減去上堵頭螺紋下突出部分,插回柱子上,另一端與20mL針筒固定后使用;將1mL柱管上方堵頭取出后斜剪斷,然后再插回柱子上(柱管內偶見有小氣泡屬正常現象,不影響親和柱的使用);

      ----準確移取上述混勻濾液,注入針筒中,調節針筒壓力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免疫親和柱;

      ----用20mL 水沖洗柱子(對于飼料及玉米加工副產品等顏色較深的樣液,先用10mL 0.1%吐溫20-PBS清洗,再用10 mL 10%甲醇-水沖洗柱子,最后用10mL水沖洗柱子。),流速1秒/滴,棄去流出液,直至2~3mL空氣通過柱體,保證柱子內沒有殘余液體;

      ----準確加入1.5mL甲醇(色譜級)洗脫,流速自然重力,直至2~3mL空氣通過柱體,保證柱子內沒有殘余液體。收集全部洗脫液,進行相關測定。

      【注意事項】

      (1)嘔吐毒素對人體有害,應戴手套操作。凡接觸到標樣的玻璃器皿都要用5%次氯酸鈉浸泡過夜。

      (2)不要使用過有效期的免疫親和柱。

      (3)免疫親和柱應在2~8℃保存。不要冷凍。

      (4)使用前,免疫親和柱需至少提前半小時回溫至室溫(25℃左右)。

      (5)HPLC液相測定值、試劑盒計算值接近zui高檢出值時,樣本的實際含量可能大于柱容量而造成流穿,建議減少上樣體積重新過柱。

      (6)稱取的樣品量以及提取液的體積可根據實際情況按比例調整,建議最低不少于10g樣。

      【保質期】

      有效期為12個月。

      生產日期見包裝盒。

    嘔吐毒素免疫親和柱

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