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    嘔吐毒素免疫親和柱,回收率高柱容量大

    產品型號:FD-C31

    更新時間:2020-04-08

    簡要描述:

    嘔吐毒素免疫親和柱,回收率高柱容量大,適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理,提高了樣品的純度,純化后的提取液可用不同的分析方法測定。

      【產品用途】

      嘔吐毒素(DON)免疫親和柱適合于和DON酶免分析試劑盒、HPLC或液質結合使用,定量檢測DON。適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理,提高了樣品的純度,純化后的提取液可用不同的分析方法測定。

    嘔吐毒素免疫親和柱

      【測定原理】

      本產品測定的基礎是抗原抗體反應,嘔吐毒素(DON)單克隆抗體連接在柱內凝膠介質上,樣品中的DON經過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢通過DON免疫親和柱,在免疫親和柱內,DON與抗體結合,洗滌液通過免疫親和柱除去未被結合的雜質。最后采用甲醇洗脫DON,然后進行相關分析。

      【樣品制備及凈化】

      ----準確稱取25.0g粉碎的樣品,加入5g聚乙二醇8000,并與125mL水混合,以均質器高速攪拌提取2min或振蕩提取30min,

      ----用快速定性濾紙過濾,并用玻璃微纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。

      【親和柱凈化】

      注意:整個純化過程盡量不要讓柱子干燥!

      ----將柱子上方堵頭取出后斜剪斷,然后再插回柱子上;

      ----將20mL注射器連接于免疫親和柱上部,用5~10mL pH7.4磷酸鹽緩沖液(PBS)或者去離子水平衡柱子,以1滴/秒的速度緩慢通過免疫親和柱,(用注射器加以正壓或用真空泵施加負壓,也可以使用泵流操作架配合免疫親和柱);

      ----準確移取2mL上述濾液(相當于0.4g樣品)注入注射器中,調節針筒壓力使其以1滴/2秒的速度緩慢通過免疫親和柱;

      ----用20mL 水沖洗柱子,棄去流出液,流速1滴/秒,直至2~3mL空氣通過柱體,保證柱子內沒有殘余液體;

      ----準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速1滴/2~3秒,直至2~3mL空氣通過柱體,保證柱子內沒有殘余液體。收集全部洗脫液,可根據實際測定條件進行稀釋或氮氣吹干后流動相定容,再進行相關測定。

      【注意事項】

      (1)嘔吐毒素對人體有害,應戴手套操作。凡接觸到標樣的玻璃器皿都要用5%次氯酸鈉浸泡過夜。

      (2)不要使用過有效期的免疫親和柱。

      (3)免疫親和柱應在2~8℃保存。不要冷凍。

      (4)使用前,免疫親和柱需至少提前半小時回溫至室溫(25℃左右)。

      (5)HPLC液相測定值、試劑盒計算值接近zui高檢出值時,樣本的實際含量可能大于柱容量而造成流穿,建議減少上樣體積重新過柱。

      (6)稱取的樣品量以及提取液的體積可根據實際情況按比例調整,建議最低不少于10g樣。

      溫馨提示:不可用于臨床治療。

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